Comment capturer les nématodes entomopathogènes ?

Le sol est l’habitat naturel des nématodes entomopathogènes. Comme il est difficile de retrouver les nématodes libres dans les sols, et de retrouver des insectes parasités naturellement par les NEPs, leur recherche se réalise à l’aide du piégeage par « Galleria trap » (Mracek, 1980). Il consiste à enfouir un contenant percé -une boule à thé, un tube eppendorf percé- dans le sol (10, 20 ou 30 cm de profondeur) dans lequel a été placée une larve d’insecte. Galleria mellonella (teigne des ruches) est l’insecte modèle utilisé comme proie car elle est connue pour sa susceptibilité vis-à-vis des NEPs (Ali et al, 2008). Cependant, toute autre larve d'insectes peut être utilisée de la même manière. Au bout de quelques jours (5 à 8 jours), les pièges sont récoltés sur site dans le but de déceler la présence de NEPs dans les cadavres d’insectes. Les cadavres parasités par des moisissures sont éliminés.

Les autres sont placés sur un dispositif de récolte (A) afin de collecter dans un liquide les IJs émergeants du cadavre. Celles-ci sont conservées après filtration (B) à basse température (8°C pour Steinernema et 15°C pour Heterorhabditis) pendant plusieurs mois en milieu aqueux à une concentration de 300-5000 IJs/mL (C) (Kaya and Stock, 1997). Les nématodes piégés seront ensuite identifiés par séquençage des régions ITS à partir de l’ADNg extrait (Malan et al, 2011).

Bibliographie

Ali, S.S., Pervez, R., Abid Hussain, M., Ahmad, R. 2008. Susceptibility of three lepidopteran pests to five entomopathogenic nematodes and in vivo mass production of these nematodes. Archiv Phytopathol Plant Prot, 41, 300-304. DOI : 10.1080/03235400600759396.

Kaya, H.K. and Stock, P. 1997. Chapter VI - Techniques in insect nematology, Editor(s): Lawrence A. Lacey, Manual of Techniques in Insect Pathology, Academic Press, 1997, Pages 281-324, ISBN 9780124325555, DOI : 10.1016/B978-012432555-5/50016-6.

Mracek, Z. 1980. The use of « Galleria traps » for obtaining nematode parasites of insects in Czechoslovakia (Lepidoptera : Nematoda, Steinernematidae). Acta Entomol Bohemoslov, 77, 378-382.

Malan, A.P., Knoetze, R., Moore, S.D. 2011. Isolation and identification of entomopathogenic nematodes from citrus orchards in South Africa and their biocontrol potential against false codling moth. J Invertebr Pathol, 108, 115-125. DOI : 10.1016/j.jip.2011.07.006.